Show simple item record

dc.contributorEncinas Martín, Mario
dc.contributorUniversitat de Lleida. Departament de Medicina Experimental
dc.creatorRozen, Esteban Javier
dc.date.accessioned2018-06-15T07:07:07Z
dc.date.available2018-06-15T07:07:07Z
dc.date.issued2009-12-06
dc.identifierL-479-2010
dc.identifier9788469321041
dc.identifierhttp://www.tdx.cat/TDX-0209110-172106
dc.identifierhttp://hdl.handle.net/10803/8274
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10459.1/63778
dc.descriptionRet és el Receptor Tirosina Quinasa (RTK) per als factors neurotrófics de la<br/>família de GDNF, que promouen supervivència, diferenciació, migració o creixement<br/>cel·lulars, entre altres efectes biològics, durant el desenvolupament i la vida dels<br/>organismes superiors. El desenvolupament de diverses subpoblacions de neurones<br/>derivades de precursors de la Cresta Neural requereixen la senyalització inducida per<br/>aquests i altres factors neurotrófics (com NGF) per a proliferar, migrar, diferenciar-se,<br/>sobreviure i créixer durant la organogénesis embrionària i/o després del naixement. Els<br/>RTKs s'encarreguen de transportar la informació química de les neurotrofines cap a<br/>l'interior de la cèl·lula per mitjà d'una varietat de rutes de senyalització molecular, que<br/>ulteriorment desemboquen en la modulació de l'expressió de diversos gens al nucli<br/>cel·lular, donant lloc a determinats efectes biològics. Així, hem estudiat els efectes de la<br/>senyalització de GDNF/Ret para la supervivència de neurones simpàtiques en cultiu<br/>primari, obtingudes de diferents línies de ratolins transgènics que portaven mutacions en<br/>residus específics de tirosina de Ret necessaris per a la iniciació de les diferents<br/>cascades de transducció de senyals. En particular, ens vam enfocar a esbrinar quines<br/>vies de senyalització eren necessàries i suficients per al manteniment de les nostres<br/>neurones simpàtiques. Els nostres experiments no només van llançar llum sobre quins<br/>són les funcions de les diferents cascades de senyalització activades per Ret, sinó que<br/>també ens van permetre establir que la supervivència d'aquestes cèl·lules, induïda per<br/>GDNF i per NGF, ocorre a través d'un nou mòdul de transducció mai abans<br/>caracteritzat, en el qual l'activació de Tyr1062 de Ret (residu necessari per a l'activació<br/>de les cascades PI3K/Akt i Ras-ERK/MAPK) promouria la viabilitat neuronal a través<br/>de l'activació directa del complex IKKs per B-Raf, en un procés que és independent tant<br/>de l'activació de MEKs/ERKs com de la via PI3K/Akt.<br/>Alternativament, vam analitzar el paper de les proteïnes de la família de Sprouty,<br/>específicament de Spry1, en la regulació de l'activitat de Ret, tant en el model de<br/>supervivència de neurones simpàtiques, com en altres paradigmes en els quals la<br/>rellevància d'aquestes proteïnes ja s'ha posat de manifest anteriorment, com són el<br/>desenvolupament del Sistema Nerviós Entèric i l'organogènesi del tracte Gènito-<br/>Urinari. Valent-nos d'un model in vivo amb ratolins nuls per al gen Sprouty1, vam<br/>desenvolupar una nova línia de ratolins doblement mutantes, portant, a més d'aquesta última modificació, el gen de Ret amb la mutació Tyr1062Phe. En aquest context, vam<br/>poder determinar que tant en el Sistema Nerviós Simpàtic com en el Entèric, l'absència<br/>de Spry1 no tenia cap efecte significatiu. Más encara, aquesta mutació no mostrava cap<br/>conseqüència sobre els defectes característics de la mutació Tyr1062Phe en Ret en<br/>aquests sistemes. No obstant això, durant el desenvolupament renal, les alteracions<br/>fenotípicas de la mutació de Ret (agènesis o hipodisplasia renal) eren revertits a un<br/>fenotip normal per l'eliminació concomitant de Spry1. Aquest sorprenent efecte ens<br/>permet hipotetitzar que Sprouty1 és capaç de modular l'activitat de Ret en absència de la<br/>seva Tyr1062, plantejant noves possibles vies de senyalització intracel·lular sobre les<br/>quals Spry1 actuaria durant el desenvolupament embrionari dels ronyons.
dc.descriptionRet es el Receptor Tirosina Quinasa (RTK) para los factores neurotróficos de la<br/>familia de GDNF, que median supervivencia, diferenciación, migración o crecimiento<br/>celulares, entre otros efectos biológicos, durante el desarrollo y la vida de los<br/>organismos superiores. El desarrollo de diversas subpoblaciones de neuronas derivadas<br/>de precursores de la Cresta Neural requieren la señalización mediada por estos y otros<br/>factores neurotróficos (como NGF) para proliferar, migrar, diferenciarse, sobrevivir y<br/>crecer durante la organogénesis embrionaria y/o tras el nacimiento. Los RTKs se<br/>encargan de transportar la información química de las neurotrofinas hacia el interior de<br/>la célula por medio de una variedad de rutas de señalización molecular, que<br/>ulteriormente desembocan en la modulación de la expresión de diversos genes en núcleo<br/>celular, dando lugar a efectos biológicos determinados. Así, hemos estudiado los efectos<br/>de la señalización de GDNF/Ret para la supervivencia de neuronas simpáticas en cultivo<br/>primario, obtenidas de diferentes líneas de ratones transgénicos que portaban<br/>mutaciones en residuos específicos de tirosina de Ret necesarios para la iniciación de<br/>las diferentes cascadas de transducción de señales. En particular, nos enfocamos en<br/>determinar qué vías de señalización eran necesarias y suficientes para el mantenimiento<br/>de nuestras neuronas simpáticas. Nuestros experimentos no sólo arrojaron luz sobre<br/>cuáles son las funciones de las diferentes cascadas de señalización activadas por Ret,<br/>sino que también nos permitieron establecer que la supervivencia de estas células,<br/>mediada por GDNF y por NGF, ocurre a través de un novedoso módulo de transducción<br/>nunca antes caracterizado, en el cual la activación de Tyr1062 de Ret (residuo necesario<br/>para la activación de las cascadas PI3K/Akt y Ras-ERK/MAPK) mediaría la viabilidad<br/>neuronal a través de la activación directa del complejo IKKs por B-Raf, en un proceso<br/>que es independiente tanto de la activación de MEKs/ERKs como de la vía PI3K/Akt.<br/>Alternativamente, analizamos el papel de las proteínas de la familia de Sprouty,<br/>específicamente de Spry1, en la regulación de la actividad de Ret, tanto en el modelo de<br/>supervivencia de neuronas simpáticas, como en otros paradigmas en los que la<br/>relevancia de dichas proteínas se ha puesto de manifiesto anteriormente, como son el<br/>desarrollo de Sistema Nervioso Entérico y la organogénesis del tracto Génito-Urinario.<br/>Valiéndonos de un modelo in vivo con ratones nulos para el gen Sprouty1,<br/>desarrollamos una nueva línea de ratones doblemente mutantes, portando, además de esta última modificación, el gen de Ret con la mutación Tyr1062Phe. En este contexto,<br/>pudimos determinar que tanto en el Sistema Nervioso Simpático como en el Entérico, la<br/>ausencia de Spry1 no tenía ningún efecto significativo. Más aún, dicha mutación no<br/>mostraba ninguna consecuencia sobre los defectos característicos de la mutación<br/>Tyr1062Phe en Ret en estos sistemas. No obstante, durante el desarrollo renal, las<br/>alteraciones fenotípicas de la mutación de Ret (agénesis o hipodisplasia renales) eran<br/>revertidas a un fenotipo normal por la eliminación concomitante de Spry1. Este<br/>sorprendente efecto nos permite hipotetizar que Sprouty1 es capaz de modular la<br/>actividad de Ret en ausencia de su Tyr1062, planteando nuevas posibles vías de<br/>señalización intracelular sobre las que Spry1 actuaría durante el desarrollo embrionario<br/>de los riñones.
dc.descriptionRet is the Receptor Tirosine Kinase (RTK) for the neurotrophic factors from the<br/>GDNF family of ligands (GFLs), which mediate cellular survival, differentiation,<br/>migration or growth, among other biological effects, during development and life of<br/>superior organisms. The development of diverse subpopulations of neurons derived<br/>from precursors of the Neural Crest requires the signalling mediated by these and other<br/>neurotrophic factors (like NGF) for their proliferation, migration, differentiation,<br/>survival and growth during the embryonic organogenesis and/or after the birth. The<br/>RTKs transport the chemical information from neurotrophins towards the interior of the<br/>cell by means of a variety of molecular pathways, that later end by modulating the<br/>expression of diverse genes in the cellular nucleus, giving rise to determined biological<br/>effects. Thus, we have studied the effects of the signalling by GDNF/Ret for the<br/>survival of sympathetic neurons in primary culture, obtained from different lines of<br/>transgenic mice that carried mutations in specific tyrosine residues in Ret, which are<br/>necessary for the initiation of different transduction signals. Particularly, we focused in<br/>determining which signalling routes are required and sufficient for the maintenance of<br/>our sympathetic neurons. Our experiments not only clarified on which are the functions<br/>for the different signalling cascades activated by Ret, but also allowed us to establish<br/>that the GDNF- and NGF-induced survival of these cells takes place through a so far<br/>unknown transduction module, in which the activation of Ret's Tyr1062 (necessary for<br/>the activation of the PI3K/Akt and ERK/MAPK cascades) mediates neuronal viability<br/>through the direct activation of the IKKs complex by B-Raf, independently<br/>MEKs/ERKs and PI3K/Akt activation.<br/>Alternatively, we analyzed the role that the Sprouty family of proteins play,<br/>specifically Spry1, in the regulation of Ret, as much in the model of survival of<br/>sympathetic neurons, like in other paradigms in which the relevance of these proteins<br/>has been shown previously, as it is the case for the development of the Enteric Nervous<br/>System and the organogenesis of the Genito-Urinary Tract. By taking advantage of an<br/>in vivo model of null-mice for the Sprouty1 gene, we developed new line of doubly<br/>mutant mice, carrying, in addition to this mentioned modification, a Tyr1062Phe<br/>mutation in Ret. In this context, we determined that either in the Sympathetic or in the<br/>Enteric Nervous Systems, the absence of Spry1 did not show any significant effect.<br/>Moreover, this mutation did not show any consequence on the characteristic defects of<br/>the Tyr1062Phe mutation in Ret for both systems. However, during the renal<br/>development, the phenotypic alterations due to Ret mutation (renal agenesis or<br/>hypodisplasia) were reverted to a normal phenotype by the concomitant elimination of<br/>Spry1. This surprising effect allowed us to hypothesize that Sprouty1 is able to<br/>modulate the activity of Ret in absence of its Tyr1062, rising new possible signalling<br/>routes on which Spry1 could act during the embryonic development of kidneys.
dc.formatapplication/pdf
dc.languagespa
dc.publisherUniversitat de Lleida
dc.rightsADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.sourceTDX (Tesis Doctorals en Xarxa)
dc.subjectmalalties
dc.subjectronyons
dc.subjectsistema nerviós
dc.subjecttransducció de senyal cel·lular
dc.subjectbiologia del desenvolupament
dc.subjectBioquímica i Biologia Molecular
dc.subject573
dc.subject577
dc.titleAnálisis de la señalización por Ret: caracterización de la cascada molecular B-Raf/IKKS y regulación de Ret por Sprouty1
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion


Files in this item

FilesSizeFormatView

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record